本標準規定了兩棲動(dòng)物多樣性觀(guān)測的主要內容、技術(shù)要求和方法。
本標準適用于中華人民共和國范圍內兩棲動(dòng)物多樣性的觀(guān)測。
本標準內容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用 于本標準。
GB/T 7714 文后參考文獻著(zhù)錄規則
GB/T 8170 數值修約規則與極限數值的表示和判定
HJ 623 區域生物多樣性評價(jià)標準
HJ 628 生物遺傳資源采集技術(shù)規范（試行）
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標準。
3.1
樣線(xiàn)法 line transect method
指觀(guān)測者在觀(guān)測樣地內沿選定的一條路線(xiàn)記錄一定空間范圍內出現的物種相關(guān)信息的方法。該法適用于各種生境。
3.2
樣方法 quadrat sampling method
指在設定的樣方中計數見(jiàn)到的動(dòng)物實(shí)體的觀(guān)測方法。該法適用于各種生境。
3.3
柵欄陷阱法 drift fences and pitfall trapping method
柵欄陷阱法由柵欄和陷阱兩部分組成。柵欄可使用動(dòng)物不能攀越或跳過(guò)的、具有一定高度的塑料篷布、塑料板、鐵皮等材料搭建，設置成直線(xiàn)或折角狀。在柵欄底緣的內側或（和） 外側，沿柵欄挖埋一個(gè)或多個(gè)陷阱捕獲器，陷阱捕獲器可以是塑料桶或金屬罐。該法適用于泥土基質(zhì)的生境且攀爬能力較弱的物種的觀(guān)測。
3.4
人工覆蓋物法 artificial cover method
在兩棲動(dòng)物棲息地按照一定大小、一定密度布設人工覆蓋物，吸引兩棲動(dòng)物在白天匿居 于其中，以檢查匿居動(dòng)物的種類(lèi)和數量。該法適用于草地、濕地、灌叢、灘涂等自然隱蔽物 較少的生境。
3.5
人工庇護所法artificial refuge method
把竹筒（或 PVC 桶）捆綁固定在樹(shù)上或地上，查看竹筒中兩棲動(dòng)物成體、幼體、蝌蚪和卵。該法適用于樹(shù)棲型蛙類(lèi)較多且靜水生境較少的南方森林。
3.6
標記重捕法mark-recapture method
在一個(gè)邊界明確的區域內，捕捉一定數量的動(dòng)物個(gè)體進(jìn)行標記，標記完后及時(shí)放回，經(jīng) 過(guò)一個(gè)適當時(shí)期（標記個(gè)體與未標記個(gè)體充分混合分布）后，再進(jìn)行重捕并計算其種群數量 的方法。
4.1 科學(xué)性原則
觀(guān)測樣地和觀(guān)測對象應具有代表性，能全面反映觀(guān)測區域兩棲動(dòng)物的整體狀況；應采用科學(xué)、統一的觀(guān)測方法，能觀(guān)測到兩棲動(dòng)物及其種群的變化趨勢。
4.2 可操作性原則
觀(guān)測計劃應考慮所擁有的人力、資金和后勤保障等條件，觀(guān)測樣地應具備一定的交通條 件和工作條件。應采用效率高、成本低的觀(guān)測方法。
4.3 持續性原則
觀(guān)測工作應滿(mǎn)足生物多樣性保護和管理的需要，并能對保護和管理起到指導及預警作 用。觀(guān)測樣地、樣線(xiàn)、樣方、方法、時(shí)間和頻次一經(jīng)確定，應保持長(cháng)期固定，不能隨意變動(dòng)。
4.4 保護性原則
選擇對野生物種、種群破壞較小的觀(guān)測方法，避免超出客觀(guān)需要的頻繁觀(guān)測。若要捕捉 國家重點(diǎn)保護野生動(dòng)物進(jìn)行取樣或標記，必須獲得相關(guān)管理部門(mén)的行政許可。
4.5 安全性原則
觀(guān)測具有一定的野外工作特點(diǎn)，觀(guān)測者應接受相關(guān)專(zhuān)業(yè)培訓，做好安全防護措施。
5.1 觀(guān)測準備
5.1.1 明確觀(guān)測目的。開(kāi)展兩棲動(dòng)物觀(guān)測的目的是了解兩棲動(dòng)物多樣性的現狀和變化趨勢， 掌握人類(lèi)活動(dòng)等干擾因素對兩棲動(dòng)物的影響，為全國兩棲動(dòng)物多樣性保護和管理工作提供技術(shù)支撐。
5.1.2 選擇觀(guān)測對象。觀(guān)測對象應是觀(guān)測區域內所有的兩棲動(dòng)物，也可針對某一類(lèi)群或特定 物種（瀕危物種或保護物種）開(kāi)展觀(guān)測。
5.1.3 確定觀(guān)測區域。在開(kāi)展觀(guān)測之前，要了解和熟悉觀(guān)測對象的生物學(xué)和分布特征，確定 觀(guān)測區域?？梢愿鶕煌锓N生活史特點(diǎn)以及活動(dòng)節律（如繁殖、遷移、越冬等），選擇兩棲動(dòng)物分布的重要地區、典型地區、過(guò)渡地區等開(kāi)展觀(guān)測。
5.1.4 制定觀(guān)測方案。觀(guān)測方案應包括觀(guān)測范圍、觀(guān)測方法、觀(guān)測內容和指標、觀(guān)測時(shí)間、 數據處理、觀(guān)測者等。
5.1.5 培訓觀(guān)測者。為觀(guān)測者提供分類(lèi)鑒定、觀(guān)測方法和野外安全培訓，使其能在野外準確 地識別兩棲動(dòng)物成體、亞成體、幼體、蝌蚪和卵，掌握野外操作規程和安全防范措施。
5.1.6 準備觀(guān)測儀器和工具。包括塑料桶、塑料布、鐵鍬、瓦片、竹筒（或 PVC 桶）、廣口瓶、卷尺、游標卡尺、手術(shù)剪、鑷子、脫脂棉、組織管、組織盒、注射器、照相機、全球定 位系統（GPS）定位儀、pH 計、指南針、電子秤、電子標簽、福爾馬林、乙醇、蛇藥、外傷藥等。
5.2 觀(guān)測樣地設置
5.2.1 觀(guān)測樣地應具有代表性，能代表觀(guān)測區域的不同生境類(lèi)型。
5.2.2 所選擇的觀(guān)測樣地應操作方便、可行，便于觀(guān)測工作的開(kāi)展。
5.2.3 所選擇的觀(guān)測樣地一旦確定應保持固定，以利于觀(guān)測工作的長(cháng)期開(kāi)展。
5.2.4 采用 GPS 定位儀和其他方法對觀(guān)測樣地定位，并在電子地圖上標明觀(guān)測樣地的位置。
5.3 樣線(xiàn)法
5.3.1 根據兩棲動(dòng)物分布與生境因素的關(guān)系如海拔梯度、植被類(lèi)型、水域狀態(tài)等設置樣線(xiàn)。 樣線(xiàn)盡可能涵蓋不同生態(tài)系統類(lèi)型。
5.3.2 在濕地或草地生態(tài)系統，可采用長(cháng)樣線(xiàn)，長(cháng)度 500～1000 m 之間；在生境較為復雜的山地生態(tài)系統，可設置多條短樣線(xiàn)，長(cháng)度 20～100 m 之間。每個(gè)觀(guān)測樣地的樣線(xiàn)應在 7 條以上，短樣線(xiàn)可適當增加數量。樣線(xiàn)的寬度根據視野情況而定，一般為 2～6 m。
5.3.3 在水邊觀(guān)測兩棲動(dòng)物可以在水陸交匯處行走。觀(guān)測時(shí)行進(jìn)速度應保持在 2 km/h 左右， 行進(jìn)期間記錄物種和個(gè)體數量，不宜拍照和采集。通常 2 人合作，1 人觀(guān)測、報告種類(lèi)和數量，另 1 人填表記錄（記錄表參見(jiàn)附錄 A）。
5.3.4 利用 GPS 定位儀對樣線(xiàn)的起點(diǎn)和終點(diǎn)進(jìn)行定位，可以開(kāi)啟手持 GPS 定位儀的線(xiàn)路功能，將樣線(xiàn)線(xiàn)路附加到電子地圖上。
5.3.5 根據兩棲動(dòng)物的活動(dòng)節律，一般在晚上開(kāi)展觀(guān)測。每條樣線(xiàn)在不同天開(kāi)展 3 次重復觀(guān)測，應保持觀(guān)測時(shí)氣候條件相似。
5.3.6 樣線(xiàn)法能估算種群相對密度，計算方法如下：
?
式中：
Di——樣線(xiàn) i 的種群密度；
Ni——樣線(xiàn) i 內物種的個(gè)體數；
Li——樣線(xiàn) i 的長(cháng)度；
Bi——樣線(xiàn) i 的寬度。
5.4 樣方法
5.4.1 在觀(guān)測樣地內隨機或均勻設置一定數量的樣方，樣方應盡可能涵蓋不同的生境類(lèi)型和 環(huán)境梯度。樣方一般設置為方形，大小可設置成 5 m×5 m 或 10 m×10 m。樣方之間應間隔100 m 以上。每個(gè)觀(guān)測樣地的樣方數應在 7 個(gè)以上。
5.4.2 記錄樣方內見(jiàn)到的所有兩棲動(dòng)物種類(lèi)和個(gè)體數量（記錄表參見(jiàn)附錄 B）。依次翻開(kāi)樣方內的石塊，檢視石塊下的個(gè)體（包括卵）。
5.4.3 樣方法能估算種群相對密度，計算方法同樣線(xiàn)法。
5.5 柵欄陷阱法
5.5.1 柵欄應有支撐物支持，保持直立，高出地面 35～50 cm，埋入地下至少 10 cm。
5.5.2 陷阱口沿要與地面平齊，陷阱邊緣緊貼柵欄。陷阱內可放置一些覆蓋物如碎瓦片等， 以備落入其中的兩棲動(dòng)物藏身；同時(shí)加入少量水（1～5 cm），或將海綿浸水后放入陷阱中，增加兩棲動(dòng)物的存活率。根據觀(guān)測區內的物種情況設置陷阱深度。
5.5.3 對于水位變動(dòng)較大的河湖周邊的陷阱，應根據水線(xiàn)距離增補陷阱，保持不同季節的陷阱距離水線(xiàn)位置一致。在雨季應防止雨水注滿(mǎn)陷阱，避免發(fā)揮不了觀(guān)測作用，傷害野生動(dòng)物。
5.5.4 每個(gè)樣地至少設置 5 個(gè)陷阱，每天或隔天巡視檢查 1 次，連續 10 天觀(guān)測（記錄表參見(jiàn)附錄 C）。
5.5.5 在非觀(guān)測期間，應將陷阱掩埋或蓋上，以免對動(dòng)物造成傷害。
5.6 人工覆蓋物法
5.6.1 人工覆蓋物的數目和尺寸主要取決于統計分析的要求和物種個(gè)體大小、種群數量等因 素。
5.6.2 人工覆蓋物的材質(zhì)和厚度。木板或波浪狀的瓦片是較好的覆蓋物材料；在寒冷的冬季 或高寒地區，膠合板的效果較好。人工覆蓋物的尺寸一般為 30 cm×20 cm 或以上。樣地內應采用統一的覆蓋物。
5.6.3 人工覆蓋物的排列方式一般設置成平行線(xiàn)、網(wǎng)格等形狀。網(wǎng)格形狀的排列方式可采用5 個(gè)×5 個(gè)覆蓋物的樣方，覆蓋物之間的間距為 5 m。
5.6.4 可在放置覆蓋物的地方下挖 5 cm，形成足夠的隱蔽空間，坑底鋪放一些草葉，形成一個(gè)適宜的隱蔽環(huán)境。
5.6.5 每天早晨 8～10 時(shí)查看一次。查看時(shí)迅速拿起覆蓋物，捕獲匿居其下的兩棲動(dòng)物，并臨時(shí)放在塑料袋或廣口瓶中以備測量、標記和采樣（記錄表參見(jiàn)附錄 D）。連續 10 天觀(guān)測。
5.7 人工庇護所法
5.7.1 在樣地內隨機設置 3 個(gè) 10 m×10 m 的樣方，樣方之間應間隔 100 m 以上。在每個(gè)樣方內，挑選樹(shù)蛙常選擇的產(chǎn)卵樹(shù) 10 棵，每棵樹(shù)捆綁固定 6 個(gè)竹筒（或 PVC 桶），2 個(gè)在地面，2 個(gè)離地面 70 cm，2 個(gè)離地面 150 cm，共布設 60 個(gè)竹筒（或 PVC 桶）。
5.7.2 竹筒長(cháng) 15～18 cm，內徑 3～6 cm，竹筒內加入 5～10 cm 深的水。
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