SN/T 3084.2-2014 進(jìn)出口化妝品眼刺激性試驗 角膜細胞試驗方法

1 范圍

      SN/T 3084的本部分規定了化妝品眼刺激性角膜細胞試驗方法。

      本部分適用于化妝品原料和成品眼刺激性體外篩選試驗。

      本部分適用于部分化妝品使用的表面活性劑的篩選測試。

本部分可作為眼刺激性動(dòng)物試驗的替代方法之一?？梢越Y合其他眼刺激替代試驗，對眼刺激效應進(jìn)行綜合評價(jià)。

      本部分可作為其他領(lǐng)域眼刺激體外測試的參考方法。

2 規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

      SN/T 2285 化妝品體外替代試驗實(shí)驗室規范

3 術(shù)語(yǔ)和定義

      下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
3.1

      眼刺激性 eye irritation

      眼球表面接觸受試樣品后產(chǎn)生的可逆性炎性變化。

3.2

      SIRC細胞系 statens seruminstitut rabbit cornea cell line

      來(lái)源于兔眼角膜組織的成纖維細胞系。

3.3

      STE試驗 short time exposure test

      采用SIRC細胞進(jìn)行的短時(shí)間暴露試驗，本部分指5 min暴露試驗。

4 原理
      本試驗采用來(lái)源于眼刺激靶器官的SIRC細胞系，將樣本干預細胞5 min，然后去除。采用CCK-8 細胞毒性測試法（cell counting kit-8 cytotoxicity test)，使千預后的細胞與CCK-8試劑反應，活細胞線(xiàn)粒體中的脫氫酶會(huì )將CCK-8試劑還原成橙黃色的甲攢染料，活細胞越多，被還原成的染料越多，顏色深淺與細胞數目呈線(xiàn)性關(guān)系。通過(guò)測定波長(cháng)450 nm時(shí)的吸光度值，計算細胞的生存率，判斷樣品的眼刺激性。本部分為STE短時(shí)暴露試驗，適用于不同溶解性狀的樣本。

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