HJ 442.5-2020 近岸海域環(huán)境監測技術(shù)規范 第五部分 近岸海域生物質(zhì)量監測

1 適用范圍

      本標準規定了近岸海域生物質(zhì)量樣品采集、保存與運輸、樣品制備、樣品分析、質(zhì)量控制等方面的內容。

      本標準適用于近岸海域生物質(zhì)量監測。

2 規范性引用文件

      本標準內容引用了下列文件中的條款。凡未注明日期的引用文件，其有效版本適用于本標準。

      GB 17378.3 海洋監測規范 第 3 部分：樣品采集、保存與運輸

      GB 18421 海洋生物質(zhì)量標準

      HJ 168 環(huán)境監測 分析方法標準制修訂技術(shù)導則

      HJ 442.1 近岸海域環(huán)境監測技術(shù)規范 第一部分 總則

      HJ 442.2 近岸海域環(huán)境監測技術(shù)規范 第二部分 數據處理與信息管理

      HJ 442.4 近岸海域環(huán)境監測技術(shù)規范 第四部分 近岸海域沉積物監測

      HJ 442.10 近岸海域環(huán)境監測技術(shù)規范 第十部分 評價(jià)及報告

      HJ 730 近岸海域環(huán)境監測點(diǎn)位布設技術(shù)規范

3 近岸海域生物質(zhì)量監測的一般要求

      近岸海域生物質(zhì)量例行監測實(shí)施方案制定按 HJ 442.1 相關(guān)要求執行；監測點(diǎn)位布設按HJ 730 相關(guān)要求執行；數據處理與數據上報按 HJ 442.2 要求執行；評價(jià)與報告按 HJ 442.10 要求執行。

      國家確定的重要河口海灣和重點(diǎn)區域例行監測的生物質(zhì)量監測頻次為每年 1 次，其他區域可根據監測條件和評價(jià)要求按照每年 1 次或每 2 年 1 次，采樣時(shí)間安排在 7～8 月或貝類(lèi)成熟期。生物成熟期根據各地的具體情況確定，不同年份的采樣時(shí)間應保持一致。采集   甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和藻類(lèi)樣品根據監測目的確定采樣的頻次和時(shí)間，采樣一般在捕撈期；養殖   魚(yú)蝦類(lèi)監測一般在成熟期；不同年份的采樣時(shí)間應保持一致。

      例行監測的必測項目為 GB 18421 規定的貝類(lèi)污染評價(jià)項目；選測項目為監測區內域除 GB 18421 規定的項目外的其他貝類(lèi)污染因子、其他生物（甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和藻類(lèi)）質(zhì)量等。

      其他監測任務(wù)的生物質(zhì)量監測項目、時(shí)間、頻次等依據監測目的確定。

4 生物質(zhì)量樣品采集、保存與運輸

4.1 樣品的采集

4.1.1 基本原則

      a）區域代表性原則。例行監測的樣品采集，應能反映監測海域生物受污染物影響的累積狀況；應選擇能代表不同類(lèi)型的生境（潮間帶、潮下帶和近岸海區）；盡可能避開(kāi)污染源。其他專(zhuān)題監測的樣品采集，應選擇符合監測目的和適于專(zhuān)題評價(jià)的  區域。

      b）物種代表性原則。例行監測采集的樣品種類(lèi)，應按照 GB 18421 選擇貝類(lèi)樣品； 當不能滿(mǎn)足 GB 17378.3 要求時(shí)，應選擇當地優(yōu)勢種；如開(kāi)展甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和一般藻類(lèi)生物質(zhì)量監測時(shí)，應采集當地優(yōu)勢種或經(jīng)濟類(lèi)種類(lèi)。

4.1.2 樣品種類(lèi)的選擇

      種類(lèi)應選擇產(chǎn)量豐富，最好是食用的經(jīng)濟生物；本區域的定居者，生命周期要求為一年以上；有適當的大小，以提供足夠的組織樣品進(jìn)行分析；對污染物有較強的積累能力； 種類(lèi)以貝類(lèi)為主，根據海區（灘涂）特征可增選魚(yú)類(lèi)、甲殼類(lèi)和藻類(lèi)；根據我國海洋生物分布的特點(diǎn)，建議采樣的貝類(lèi)為貽貝、牡蠣、蚶類(lèi)、蛤類(lèi)、蟶類(lèi)等；魚(yú)類(lèi)為黃魚(yú)、梅童魚(yú)、鯧魚(yú)、鯔魚(yú)、鲆鰈魚(yú)等；甲殼類(lèi)為梭子蟹、鱘、蝦等；藻類(lèi)為海帶、紫菜、馬尾藻等。具體種類(lèi)可視當地實(shí)際情況確定。

4.2 樣品的采集

4.2.1 采樣方式

      采樣方式包括底棲拖網(wǎng)捕撈、近岸定點(diǎn)養殖采樣、漁船捕撈、沿岸海域定置網(wǎng)捕撈及垂釣或市場(chǎng)直接購買(mǎi)，獲取的樣品應為新采集且未受污染的樣品。

4.2.2 采樣工具

      在采樣時(shí)應注意采樣工具對待測項目的影響，測定金屬項目不能使用一般的鐵質(zhì)工具和鍍鋅、鍍鉻工具。

4.2.3 采樣區域

      近岸海域環(huán)境質(zhì)量監測點(diǎn)位的樣品采集，可在點(diǎn)位及附近區域直接采集；其中臨岸近岸海域環(huán)境質(zhì)量監測點(diǎn)位樣品采集也可在臨近區域的潮間帶或養殖場(chǎng)等采集。對監測點(diǎn)位附近不能采集到樣品時(shí)，應注明實(shí)際情況。

      潮間帶區域的貝類(lèi)應定點(diǎn)采集；潮下帶和近岸海域的貝類(lèi)、魚(yú)、蝦、藻類(lèi)樣品在當地養殖場(chǎng)、漁船、漁港采集。

4.2.4 樣品數量

      貝類(lèi)采集體長(cháng)大致相似的個(gè)體約 1.5 kg；藻類(lèi)取樣量約 100 g；甲殼類(lèi)、魚(yú)類(lèi)等生物的取樣量約 1.5 kg，以保證足夠數量（一般需要 100 g 肌肉組織）的完好樣品用于分析測定。采集到的樣品現場(chǎng)用海水沖洗干凈。用于細菌學(xué)指標檢測的樣品，采樣全過(guò)程嚴格執行無(wú)菌操作。

      采用現場(chǎng)采平行樣分析生物體污染濃度分布范圍時(shí)，應采集現場(chǎng)平行樣，樣品數量應  滿(mǎn)足分析要求的需要。

4.3 樣品的保存與運輸

4.3.1 樣品保存

      所采生物樣品應放入雙層聚乙烯袋中冷凍保存（-10℃～-20℃），樣品在未發(fā)生變質(zhì)前測定；用于細菌學(xué)指標檢測的樣品，放入冰瓶冷藏（0℃～4℃）保存且不得超過(guò) 24 h。

4.3.2 樣品運輸

      樣品采集后，若長(cháng)途運輸，需把樣品放入冰箱中，始終讓其處于低溫狀態(tài)并防止沾污。

5 生物質(zhì)量樣品的制備

5.1 貽貝樣的制備

      用塑料刀或塑料刷除去貝殼外部所有的附著(zhù)物。用蒸餾水或清潔的海水漂洗每一個(gè)貽貝，讓其自然流干，拉出足絲。用另一把塑料刀插入足絲伸出口，切開(kāi)閉合肌，打開(kāi)貽貝。用蒸餾水或清潔的表層海水洗貝殼內的軟組織，用塑料刀和鑷子取出軟組織，讓水流盡。于勻漿器中勻化樣品，將勻漿樣放回原塑料容器，再稱(chēng)重，并記錄總重量，計算勻漿重。貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。

5.2 甲殼類(lèi)樣品的制備

      用塑料刀將腹部與頭胸部及尾部分開(kāi)，小心將其內臟從腹部取出，腿全部切除。將腹部翻下，用塑料刀沿腹部外甲邊緣切開(kāi)，用塑料鑷子取下內側外甲并棄去。用另一把塑料刀松動(dòng)腹部肌肉，并用鑷子取出肌肉。用鑷子將肌肉移入塑料容器中，稱(chēng)重并記錄鮮重。蓋緊容器，貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。

5.3 中小型魚(yú)樣制備

      用蒸餾水或清潔表層海水洗滌魚(yú)樣，將它放在工作臺上，用塑料刀切除胸鰭并切開(kāi)背鰭附近自頭至尾部的魚(yú)皮。在鰓附近和尾部，橫過(guò)魚(yú)體各切一刀；在腹部，鰓和尾部?jì)蓚雀髑幸坏?。四刀只切在魚(yú)體一側，且不得切太深，以免切開(kāi)內臟，沾污肉片。用鑷子將魚(yú)皮與肉片分離，謹防外表皮沾污肉片。用另一把塑料刀將肌肉與脊椎分離，并用鑷子取下肌肉。將組織盛于塑料容器中，稱(chēng)重并記錄重量。若一側的肌肉量不能滿(mǎn)足分析用量，取另一側肌肉補充。用勻漿器勻化魚(yú)組織，將勻漿轉入已知重量的塑料容器中，蓋緊，并稱(chēng)重，記下勻漿重和其他數據。貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。

5.4 大型魚(yú)樣制備

      若必要，將冷凍的樣品放在 0℃～4℃冰箱中過(guò)夜，使部分解凍以便于切片。用蒸餾水或清潔海水洗滌魚(yú)樣，置于清潔的工作臺上。剔除殘存的皮和骨，用塑料刀切去表層，再   用另一把塑料刀重復操作一次，留下不受污染的均勻的肌肉組織。將肌肉組織放入塑料容   器中，蓋緊，稱(chēng)重，將全部數據記入記錄表，貼上樣品標簽，待測或冷凍保存。

6 生物質(zhì)量樣品的分析

6.1 方法選擇

      監測分析方法按照 HJ 442.1 的相關(guān)要求選擇。常用現場(chǎng)測試和實(shí)驗室分析方法參見(jiàn)附錄 A。

6.2 方法驗證

      按照 HJ 442.1 的相關(guān)要求，在初次使用方法、條件發(fā)生變化時(shí)，需要開(kāi)展方法的驗證或確認并符合相關(guān)要求后，方可用于樣品測定。

7 生物質(zhì)量監測質(zhì)量控制

7.1 基本要求

      組織機構、人員、儀器設備等基本要求按照 HJ 442.1 相關(guān)規定執行。

7.2 樣品采集質(zhì)量控制

      樣品采集應避免采樣工具對樣品沾污，在獲取單個(gè)樣品不足以進(jìn)行分析時(shí)，應采多個(gè)生物體用于試樣的制備；運輸和保存需要避免保存容器和保存條件對樣品沾污，同時(shí)避免樣品發(fā)生質(zhì)變。

7.3 實(shí)驗室質(zhì)量控制

      實(shí)驗室的分析人員自控和實(shí)驗室內部他控按以下要求進(jìn)行。

      a）按照要求，開(kāi)展方法的驗證和確認；

      b）生物質(zhì)量樣品分析質(zhì)量控制一般采用實(shí)驗室平行樣分析、標準樣品分析等方法進(jìn)  行，方法有加標回收率要求的可采用加標回收樣品控制，分析中應注意單個(gè)生物  體和多個(gè)生物體樣品的制備、樣品前處理一致性等；

      c）分析人員自控一般采用明碼樣控制，實(shí)驗室他控可采用密碼和明碼兩種方式；

      d）實(shí)驗室他控采用從分析樣中按 HJ 442.4 表 2 比例隨機抽取檢查樣，分別另編樣品號，與原樣品同等測試，開(kāi)展實(shí)驗室他控；

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