本標準規定了測定水中浮游植物的 0.1 ml 計數框-顯微鏡計數法。本標準適用于地表水中浮游植物的密度測定。
樣品濃縮 50 倍時(shí)，對角線(xiàn)方式計數方法檢出限為 9.2×103 cells/L；行格方式計數方法檢出限為3.0×103 cells/L；全片方式計數方法檢出限為 9.2×102 cells/L；隨機視野方式計數的方法檢出限與觀(guān)察的視野數、顯微鏡視野面積有關(guān)，按附錄A 計算。
本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標準。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。
GB/T 14581 水質(zhì) 湖泊和水庫采樣技術(shù)指導
HJ/T 91 地表水和污水監測技術(shù)規范
HJ 494 水質(zhì) 采樣技術(shù)指導
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標準。
3.1
浮游植物 phytoplankton
在水中營(yíng)浮游生活的微小藻類(lèi)植物，通常浮游植物就是浮游藻類(lèi)，包括原核的藍藻和其它各類(lèi)真核藻類(lèi)。
3.2
顯微鏡計數視野 microscope counting field
顯微鏡視野中限定一定面積的區域，用于定量計數浮游植物。
3.3
檢出限 detection limit
單次計數過(guò)程中，發(fā)現的概率不低于 99%時(shí)最低的浮游植物密度。
在顯微鏡下，利用 0.1 ml 計數框對樣品中的浮游植物進(jìn)行人工分類(lèi)和計數，計算單位體積樣品中各種類(lèi)浮游植物的細胞數量。
除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國家標準的分析純試劑，實(shí)驗用水為新制備的去離子水或蒸餾水。
5.1 碘（I2）。
5.2 碘化鉀（KI）。
5.3 甲醛溶液：w(HCHO)＝37%～40%。
5.4 丙三醇（HOCH2CHOHCH2OH）。
5.5 魯哥氏碘液：
稱(chēng)取 60 g 碘化鉀（5.2），溶于 100 ml 水中，再加入 40 g 碘（5.1），充分攪拌使其完全溶解，加水定容至 1000 ml，轉移至棕色磨口玻璃瓶，室溫避光保存。
6.1 25 號浮游生物網(wǎng)：網(wǎng)孔直徑為 0.064 mm，網(wǎng)呈圓錐形，網(wǎng)口套在銅環(huán)上，網(wǎng)底端有出水開(kāi)關(guān)活塞。
6.2 定性采樣瓶：30 ml～100 ml 廣口聚乙烯瓶。
6.3 采水器：不銹鋼或有機玻璃材質(zhì)，圓柱形。容量和深度規格要滿(mǎn)足采樣要求。
6.4 定量采樣瓶：1 L～2 L 廣口聚乙烯瓶。
6.5 正置或倒置生物顯微鏡：物鏡 4×、10×、20×、40×，目鏡 10×或 15×。
6.6 濃縮裝置：1 L～2 L 筒形分液漏斗或量筒。
6.7 樣品瓶：50 ml 具塞棕色玻璃廣口瓶。
6.8 超聲波發(fā)生裝置：工作頻率 40 kHz，水浴方式。
6.9 微量移液器：100 μl。
6.10 0.1 ml 浮游植物計數框：面積 20 mm×20 mm，框內劃分橫豎各 10 行格，共 100 個(gè)小方格。
6.11 蓋玻片：面積 22 mm×22 mm，厚度小于 0.2 mm。
6.12 載物臺測微計：又稱(chēng)鏡臺測微計，1 mm/100 DIV，分劃值為 0.01 mm。
注：DIV 指等分格，1 mm/100 DIV 即 1 mm 等分成 100 格。
6.13 目鏡分劃板：又稱(chēng)目鏡測微尺，5 mm/50 DIV，分劃值為 0.1 mm。
6.14 計數器。
6.15 一般實(shí)驗室常用儀器和設備。
7.1 樣品的采集
7.1.1 定性樣品
點(diǎn)位布設及采樣頻次按照GB/T 14581、HJ/T 91 和HJ 494 的相關(guān)規定執行。也可根據調查研究目的確定。
使用 25 號浮游生物網(wǎng)（6.1）采集定性樣品。關(guān)閉浮游生物網(wǎng)底端出水活塞開(kāi)關(guān)，在水面表層至 0.5 m 深處以 20 cm/s～30 cm/s 的速度做“∞”形往復，緩慢拖動(dòng)約 1 min～3 min，待網(wǎng)中明顯有浮游植物進(jìn)入，將浮游生物網(wǎng)（6.1）提出水面，網(wǎng)內水自然通過(guò)網(wǎng)孔濾出，待底部還剩少許水樣（5 ml～10 ml）時(shí)，將底端出口移入定性采樣瓶（6.2）中，打開(kāi)底端活塞開(kāi)關(guān)收集定性樣品。采集分層樣品時(shí)，用 25 號浮游生物網(wǎng)（6.1）過(guò)濾特定水層樣品，其他步驟同采集表層樣品。定性樣品采集完成后及時(shí)將浮游生物網(wǎng)清洗干凈。樣品采集后冷藏避光運輸。
如有定性樣品采集的技術(shù)規范，按技術(shù)規范有關(guān)要求執行。
7.1.2 定量樣品
按照GB/T 14581、HJ/T 91 和HJ 494 的相關(guān)規定進(jìn)行定量樣品的采集。
用采水器（6.3）采集樣品至定量采樣瓶（6.4）中，一般采集不少于 500 ml 樣品。若水體透明度較高，浮游植物數量較少時(shí)，應酌情增加采樣體積。定量樣品采集后，樣品瓶不應裝滿(mǎn)，以便搖勻。
注 1：有些浮游植物（如藍藻）常浮于水面或成片、條帶分布，可在此水華密集區域采樣作為峰值參考。注 2：定量樣品采集應在定性樣品采集之前。應保持固定時(shí)間段采樣，以便結果之間可相互比較。
7.2 樣品的保存
7.2.1 定性樣品
定性樣品采集后立即加入魯哥氏碘液（5.5），用量為水樣體積的 1.0%～1.5%。鏡檢活體樣品不加魯哥氏碘液固定。定性樣品在室溫避光條件下可保存 3 周；1 ℃～5 ℃冷藏避光條件下可保存 12 個(gè)月?；铙w樣品在 4 ℃～10 ℃避光條件下可保存 36 h。
7.2.2 定量樣品
定量樣品采集后立即加入魯哥氏碘液（5.5）固定，用量為水樣體積的 1.0%～1.5%。也可將魯哥氏碘液（5.5）提前加入定量采樣瓶（6.4）中帶至現場(chǎng)使用。定量樣品在室溫避光條件下可保存 3 周；1 ℃～ 5 ℃冷藏避光條件下可保存 12 個(gè)月。
樣品在保存過(guò)程中，應每周檢查魯哥氏碘液（5.5）的氧化程度，若樣品顏色變淺，應向樣品中補加適量的魯哥氏碘液（5.5），直到樣品的顏色恢復為黃褐色。
注：若樣品需長(cháng)期保存，應加入甲醛溶液（5.3），用量為水樣體積的 4%。
8.1 混勻樣品
每次取樣前，采用上下顛倒至少 30 次的方式充分混勻所采樣品，混勻動(dòng)作要輕。
8.2 定性樣品的分析
在顯微鏡（6.5）下觀(guān)察定性樣品（7.1.1），鑒定浮游植物的種類(lèi)。優(yōu)勢種類(lèi)鑒定到種，其他種類(lèi)至少鑒定到屬。部分物種鑒定參考資料見(jiàn)參考文獻。
注：種類(lèi)鑒定除用定性樣品觀(guān)察外，還可吸取已完成計數的定量樣品進(jìn)行觀(guān)察。
更多標準內容點(diǎn)擊以下鏈接獲取標準全文:
掃一掃手機APP
掃一掃微信小程序