GB/T 29675-2013 化妝品中壬基苯酚的測定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法

1 范圍

      本標準規定了化妝品中壬基苯酚的液相色譜-質(zhì)譜／質(zhì)譜測定方法。

      本標準適用于膏霜、散粉、水劑、唇膏類(lèi)化妝品中壬基苯酚的測定。

      本標準對于壬基苯酚的檢出限為0.1 mg/kg，定量限為0.2 mg/kg。

2 規范性引用文件

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      B/T 6682 分析實(shí)驗室用水規格和試驗方法

3 原理

      用甲醇和二氯甲烷混合溶液提取化妝品中的壬基苯酚，提取液經(jīng)離心、固相萃取柱凈化后，用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行測定，內標法定量。

4 試劑和材料

      除非另有規定，所用試劑均為分析純。水為GB/T 6682規定的一級水。

4.1 甲醇：質(zhì)譜級。

4.2 壬基苯酚標準物質(zhì)：分子式C₁₅H₂₄O, CAS號25154-52-3，純度不小于98%，結構式參見(jiàn)附錄A的圖A.1。

4.3 4-n一壬基苯酚標準物質(zhì)：分子式C₁₅H₂₄O, CAS號104-40-5，純度不小于98%。

4.4 壬基苯酚標準儲備溶液：準確稱(chēng)取適量壬基苯酚標準物質(zhì)（精確至0. 1 mg)，以甲醇(4. 1)配制成濃度為100 μg/mL的標準儲備溶液，于4℃避光保存，可使用三個(gè)月。

4.5 4-n一壬基苯酚內標儲備溶液：準確稱(chēng)取適量4-n一壬基苯酚標準物質(zhì)（精確至0. 1 mg)，以甲醇(4. 1) 配制成濃度為10 μg/mL的內標儲備溶液，于4℃避光保存，可使用三個(gè)月。

4.6 固相萃取柱：基質(zhì)為N-乙烯毗咯烷酮-二乙烯基苯胺,200 mg,6 mL，或相當者。使用前依次用 6 mL甲醇、6 mL水活化。

4.7 無(wú)水乙醇：色譜純。

4.8 二氯甲烷：色譜純。

4.9 氨水。

5 儀器和設備

5.1 液相色譜-質(zhì)譜／質(zhì)譜（LC-MS/MS)儀：配有電噴霧離子源(ESI)。

5.2 超聲波水浴。

5.3 分析天平：感量為0.0001g和0.001g。

5.4 離心機：轉速不低于5000r/min。

5.5 微孔濾膜：0.45μm，聚四氟乙烯材質(zhì)。

6 測定步驟

6.1 樣品處理

6.1 提取

6.1.1.1 膏霜類(lèi)，散粉、水劑類(lèi)樣品

稱(chēng)取0.5g(精確至0.001g)試樣于16mL具塞玻璃離心管中，加人50μL內標儲備溶液(4.5)，再加入10mL甲醇與二氯甲烷混合溶液(8+2,體積比），超聲提取30min，以不低于5000r/min離心15min，取上清液2 mL,氮氣緩慢吹至近干，再用2mL30％甲醇水溶液渦旋溶解，作為待凈化液。

6.1.1.2 唇膏類(lèi)樣品

稱(chēng)取0.5g(精確至0.001g)試樣于16mL具塞玻璃離心管中，加入50mL內標儲備溶液(4. 5)，再加入10mL無(wú)水乙醇與二氯甲烷混合溶液(8+2，體積比），超聲提取30min,以不低于5000r/min離心15min,取上清液2 mL，氮氣緩慢吹至近干，再用2mL 30%甲醇水溶液渦旋溶解，作為待凈化液。

6.1.2 凈化

將6. 1. 1中的待凈化液轉移至固相萃取柱(4. 6)中。用3 mL 30%甲醇水溶液洗滌，抽至近干后， 6 mL甲醇二氧甲烷混合溶液(8+2,體積比）分兩次洗脫。所得洗脫液用氮氣緩慢吹至近干，用2 mL甲醇定容，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，濾液作為待測樣液。

6.2 測定條件

      液相色譜一質(zhì)譜了質(zhì)游測定的參考條件如下：

      a）色譜柱:XBridge C₁₈柱，3.5μm,150mm×2.1mm（內徑），或相當者;
      b) 流動(dòng)相：甲醇(A）和0.1%氨水溶液(B)，梯度洗脫：0~2.5min,30%A~90% A;
      2.5min~3min,90％ A~95% A;3min~6min,95% A;6min~8 min,95% A~30% A;

      c）流速：0.25mL/min

      d) 柱溫：30℃；

      e) 進(jìn)樣量：5μL;

      I) 電離方式：電噴霧電離，負離子；

g) 毛細管電壓：1.5kV;

h) 萃取電壓：3.0 V;

      i) 射頻透鏡電壓：0.5V;
      j) 離子源溫度：150℃；

      k) 脫溶劑氣：氮氣，流速500 L/h,溫度450℃；

      i) 錐孔氣：氮氣，流速50 L/h;

      m) 掃描方式：多反應監測（MRM)，定性離子對、定量離子對、錐孔電壓和碰撞氣能量見(jiàn)表1。