1 主題內容與適用范圍
1.1 主題內容
本標準規定廠(chǎng)測定水環(huán)境急性毒性的發(fā)光細菌法。
1.2 適用范圍
本標準適用于工業(yè)廢水、納污水體及實(shí)驗室條件下可溶性化學(xué)物質(zhì)的水質(zhì)急性毒性監測。
2 方法提要
基于發(fā)光細菌相對發(fā)光度與水樣毒性組分總濃度呈顯著(zhù)負相關(guān)(P≤0. 05),因而可通過(guò)生物發(fā)光光度計測定水樣的相對發(fā)光度,以此表示其急性毒性水平。
水質(zhì)急性毒性水平按8所述條件選用相當的參比毒物氯化汞濃度(以mg/L為單位)來(lái)表征,或選用EC50值(半數有效濃度―以樣品液百分濃度為單位)來(lái)表征。
3 試劑和材料
本標準所用試劑除另有說(shuō)明外,均應為符合國家標準的分析純試劑、蒸餾水或同等純度的水。
3.1 氯化汞HgCl2。
3.2 氯化鈉NaCl,化學(xué)純。
3.3 明亮發(fā)光桿菌T3小種(Photobacterium phosphoreum T3 app.)凍干粉,安瓶瓶包裝,每瓶0.5 g,在 2-5℃冰箱內有效保存期為6個(gè)月。新制備的發(fā)光細菌休眠細胞(凍干粉)密度不低于每克800萬(wàn)個(gè)細胞;當按6. 2. 4步驟將凍干粉復蘇2 mm后即發(fā)光(可在暗室內檢驗,肉眼應見(jiàn)微光),稀釋成工作液后每毫升菌液不低于1. 6萬(wàn)個(gè)細胞(5 ml測試管)或2萬(wàn)個(gè)細胞(2ml測試管)(均為稀釋平板法測定)。在毒性測試儀上測出的初始發(fā)光量應在600-1900mV之間,低于600mV允許將倍率調至"X2”檔,高于1900 mV允許將倍率調至“X0.5"檔。仍達不到標準者,更換凍干粉。
3.4 氯化鈉溶液,3 g/100ml。
氯化鈉3g于玻璃容器內,用量筒加蒸餾水100ml。
3.5 氧化鈉溶液,2g/l00ml。
氯化鈉2g,加蒸餾水100 ml,于試劑瓶?jì)龋?-5℃保存。
3.6 參比毒物氯化汞標準溶液。
0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.12,0.14,0.16,0.18,0.20,0.22,0.24 mg/L。
3.7 氯化汞母液,ρ=2000mg/L。
萬(wàn)分之一分析天平精稱(chēng)密封保存良好的無(wú)結晶水氯化汞0.1000g入50ml容量瓶,用3g/100ml 氯化鈉溶液稀釋至刻度,置2-5℃冰箱備用,保存期6個(gè)月。
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