HJ 1073-2019 水質(zhì) 萘酚的測定 高效液相色譜法

      警告：實(shí)驗中使用的標準物質(zhì)和有機溶劑均具有一定的毒性，試劑配制和樣品前處理過(guò)程應在通風(fēng)櫥內進(jìn)行，操作時(shí)應按要求佩戴防護器具，避免直接接觸皮膚和衣物。

1 適用范圍

      本標準規定了測定水中萘酚的高效液相色譜法。

      本標準適用于地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中 1-萘酚（α-萘酚）和 2-萘酚（β-萘酚）的測定。

      當取樣體積為 10.0 ml，洗脫液體積為 10.0 ml，進(jìn)樣體積為 10.0 μl 時(shí)，在發(fā)射波長(cháng) 425 nm處，本標準測定 1-萘酚和 2-萘酚的方法檢出限均為 2 μg/L，測定下限均為 8 μg/L；在發(fā)射波長(cháng) 360 nm 處，本標準測定 2-萘酚的方法檢出限為 0.2 μg/L，測定下限為 0.8 μg/L。

      當取樣體積為 50.0 ml，洗脫液體積為 10.0 ml，進(jìn)樣體積為 10.0 μl 時(shí)，在發(fā)射波長(cháng) 425 nm處，本標準測定 1-萘酚和 2-萘酚的方法檢出限均為 0.3 μg/L，測定下限均為 1.2 μg/L；在發(fā)射波長(cháng) 360 nm 處，本標準測定 2-萘酚的方法檢出限為 0.06 μg/L，測定下限為 0.24 μg/L。

2 規范性引用文件

      本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本標準。

      GB 17378.3 海洋監測規范 第 3 部分：樣品采集、貯存與運輸

      HJ 91.1 污水監測技術(shù)規范

      HJ/T 91 地表水和污水監測技術(shù)規范

      HJ/T 164 地下水環(huán)境監測技術(shù)規范

3 方法原理

      取一定量酸化后的樣品（pH 值為 1～2），用 C18 固相萃取柱萃取，甲醇洗脫，洗脫液中的萘酚經(jīng)液相色譜分離后，用熒光檢測器檢測。根據保留時(shí)間定性，外標法定量。

4 干擾和消除

4.1 水中萘胺、苯胺類(lèi)等堿性有機化合物，在酸性條件下（pH 值為 1～2）不會(huì )被 C₁₈ 固相萃取柱吸附，不干擾萘酚的測定。

4.2 常見(jiàn)的酚類(lèi)化合物（包括苯酚、2,4-二硝基酚、2,6-二甲基酚、2-甲基酚、3-甲基酚、4-甲基酚、4-氯酚、2,4-二氯酚、2,4,6-三硝基酚、1,3-苯二酚、對硝基酚、鄰氯酚、鄰硝基酚、2,4-二甲酚、4-氯間甲酚、4,6-二硝基鄰甲酚、2,4,6-三氯酚和五氯酚等），在本標準規定的熒光檢測波長(cháng)下，不干擾萘酚的測定。

4.3 與萘酚保留時(shí)間相近的其他酸性或中性有機化合物可能會(huì )干擾萘酚的測定，可通過(guò)改變流動(dòng)相的比例改善分離度，也可選擇在相對無(wú)干擾的檢測波長(cháng)下測定，避免干擾。

5 試劑和材料

      除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國家標準的分析純試劑，實(shí)驗用水為不含目標化合物物的二次蒸餾水或純水設備制備的水。

5.1 乙腈（CH₃CN）：液相色譜純。

5.2 甲醇（CH₃OH）：液相色譜純。

5.3 氫氧化鈉（NaOH）。

5.4 抗壞血酸（C₆H₈O₆）。

5.5 1-萘酚：w（C₁₀H₇OH）≥99.5%。

5.6 2-萘酚：w（C₁₀H₇OH）≥99.5%。

5.7 鹽酸：ρ（HCl）=1.18 g/ml。

5.8 鹽酸溶液：1+1。

5.9 鹽酸溶液：c（HCl）=0.01 mol/L。

      量取 1.8 ml 鹽酸溶液（5.7），用水稀釋至 1000 ml。

5.10 氫氧化鈉溶液：c（NaOH）=5 mol/L。

      稱(chēng)取 20 g 氫氧化鈉（5.3），加 100 ml 水溶解。

5.11 甲醇溶液：w（CH3OH）=0.2%。

      取 2.0 ml 甲醇（5.2），用水稀釋至 1000ml。

5.12 萘酚混合標準貯備液：ρ≈1000 mg/L。

      分別稱(chēng)取 0.10 g（準確至 0.0001 g）1-萘酚（5.5）和 2-萘酚（5.6）于 100 ml 燒杯中， 加入 100 mg 抗壞血酸（5.4），用少量甲醇（5.2）溶解，轉移至 100 ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）稀釋定容至標線(xiàn)，混勻。分裝于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。也可購買(mǎi)市售有證標準溶液，按標準溶液證書(shū)要求保存。

5.13 萘酚混合標準使用液Ⅰ：ρ=100 mg/L。

      量取適量萘酚混合標準貯備液（5.12）于 10 ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）稀釋定容至標線(xiàn)，混勻。分裝于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。

5.14 萘酚混合標準使用液Ⅱ：ρ=10.0 mg/L。

      量取 1.00 ml 萘酚混合標準使用液Ⅰ（5.13）于 10 ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）定容， 混勻。于棕色樣品瓶（6.4）中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存 3 個(gè)月。

5.15 C₁₈ 固相萃取柱：填料為十八烷基鍵合硅膠，500 mg/6 ml。

5.16 微孔濾膜：孔徑≤0.45 μm，聚四氟乙烯材質(zhì)。

6 儀器和設備

      除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國家標準的 A 級玻璃量器。

6.1 高效液相色譜儀：具熒光檢測器。

6.2 色譜柱：250 mm（長(cháng)）×4.6 mm（內徑）×5 μm（粒徑），填料為十八烷基鍵合硅膠（C₁₈），也可使用其他等效液相色譜柱。

6.3 采樣瓶：250 ml 或 500 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋棕色玻璃瓶或磨口瓶。

6.4 樣品瓶：2 ml、10 ml 或 50 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋棕色玻璃瓶。

6.5 固相萃取裝置。

6.6 一般實(shí)驗室常用儀器設備。

7 樣品

7.1 樣品的采集和保存

      采樣點(diǎn)位的布設和樣品的采集執行 HJ/T 91、HJ 91.1 或 HJ/T 164、GB 17378.3 中的相關(guān)規定。將樣品采集到采樣瓶（6.3）中，于每升樣品中加入 0.5 g 抗壞血酸（5.4），待完全溶解后，用鹽酸溶液（5.8）或氫氧化鈉溶液（5.10）調節樣品的 pH 至 1～2，密封。于 4℃以下避光冷藏運輸和保存，14 d 內完成分析。

7.2 試樣的制備

      將 C18 固相萃取柱（5.15）固定在固相萃取裝置（6.5）上，依次用 9 ml 甲醇（5.2）和 9 ml 鹽酸溶液（5.9）活化，始終保持柱頭浸潤。將樣品（7.1）平衡至室溫，搖勻。根據樣品中目標化合物含量，量取 10.0 ml～50.0 ml 樣品于樣品瓶（6.4）中，然后使樣品以 3～4 ml/min 流速通過(guò)萃取柱。在柱填料剛好暴露于空氣之前，用 5 ml 水，分 2 次沖洗樣品瓶。洗滌液一并轉移至柱上，棄去流出液。加壓擠出或抽干萃取柱中的水后，用 10.0 ml 甲醇（5.2）洗脫，接收洗脫液于 10 ml 樣品瓶（6.4）中，待初始洗脫液流出后，關(guān)閉活塞，浸泡固相萃取柱至少 5 min。打開(kāi)活塞，收集全部洗脫液，用甲醇（5.2）定容至 10.0 ml，混勻，用微孔濾膜（5.16）過(guò)濾，待測。

      注 1：對于基體復雜、有機物含量未知的樣品，為避免穿透，可以分別用兩根固相萃取柱萃取不同體積的同一個(gè)樣品。例如，分別萃取 10.0 ml 和 20.0 ml 樣品，當后者的測定結果（試樣濃度）比前者低 20%時(shí)，即說(shuō)明后者的吸附容量已達到飽和，需適當減少取樣量或將樣品稀釋后再固相萃取。

      注 2：對于清潔樣品（不包括高鹽水和海水），也可將樣品（7.1）用微孔濾膜（5.16）過(guò)濾后，直接進(jìn)樣。其方法檢出限可參考取樣體積和洗脫液體積均為 10.0 ml 的相關(guān)數據。

7.3 空白試樣的制備

      用實(shí)驗用水代替樣品，按照與試樣的制備（7.2）相同的步驟進(jìn)行空白試樣的制備。

8 分析步驟

8.1 儀器參考條件

      流動(dòng)相 A：乙腈（5.1），流動(dòng)相 B：甲醇溶液（5.11）。

      洗脫程序：流動(dòng)相 A/流動(dòng)相 B=47/53（V/V）；

      流速：1.2 ml/min；

      進(jìn)樣體積：10.0 μl；

      柱溫：35℃；

      檢測器：熒光檢測器；

      激發(fā)波長(cháng)：228 nm；

      發(fā)射波長(cháng)：同時(shí)測定 1-萘酚和 2-萘酚時(shí)，選擇 425 nm 作為定量檢測波長(cháng)，435 nm 作為輔助定性波長(cháng)；只測定 2-萘酚或在 425 nm 處測定 2-萘酚有干擾時(shí)，選擇 360 nm 作為定量檢測波長(cháng)，350 nm 作為輔助定性波長(cháng)。

      對于基體復雜的樣品，應采用梯度洗脫。梯度洗脫參考程序見(jiàn)表 1。

表 1 梯度洗脫參考程序

8.2 校準

8.2.1 標準系列的配制

      分別取適量萘酚混合標準使用液Ⅱ（5.14）或萘酚混合標準使用液Ⅰ（5.13）于 10 ml棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，配制至少包含 5 個(gè)濃度點(diǎn)的標準系列。標準系列溶液配制及其參考濃度見(jiàn)表 2。

?表 2 標準系列溶液配制及其參考濃度?

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