HJ 628-2011 生物遺傳資源采集技術(shù)規范（試行）

1 適用范圍

      本標準規定了野生生物遺傳資源采集的程序、技術(shù)規程和注意事項等。

      本標準適用于中華人民共和國境內野生生物遺傳資源（動(dòng)物、植物、大型真菌等）的采集。

2 規范性引用文件

      本標準引用了下列文件或其中的條款。

      《國家重點(diǎn)保護野生動(dòng)物名錄》  （國函[1988]144 號）

      《國家重點(diǎn)保護野生植物名錄（第一批）》 （國函[1999]92 號）

3 術(shù)語(yǔ)和定義

      下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標準。

3.1 生物遺傳資源genetic resources

      有實(shí)際或潛在價(jià)值（包括經(jīng)濟、社會(huì )、文化、環(huán)境等方面價(jià)值）的，來(lái)自植物、動(dòng)物、微生物或其他來(lái)源的任何含有遺傳功能單位的材料，包含物種及物種以下的分類(lèi)單元（亞種、變種、變型、品種、品系、類(lèi)型），包括個(gè)體、器官、組織、細胞、染色體、DNA 片段和基因等多種形態(tài)。

3.2 非損傷性取樣non-invasive sampling

      在不捕獲甚至不看到動(dòng)物的情況下，通過(guò)收集脫落的毛發(fā)、羽毛、糞便、食物殘渣、卵殼、蛹殼等樣品的取樣方法。

3.3 非傷害性取樣non-destructive sampling

      通過(guò)捕獲動(dòng)物來(lái)采集血液、毛發(fā)、羽毛、鱗片、腳趾等組織，不對其生理機能產(chǎn)生重大影響的取樣方法。

3.4 傷害性取樣destructive sampling

      通過(guò)嚴重傷害甚至殺死動(dòng)物而獲得新鮮肌肉、器官等組織樣品的取樣方法。

4 基本原則

4.1 合法性原則

      采集生物遺傳資源不得違反國家相關(guān)法律法規的規定，采集之前應按相關(guān)規定向國家或地方相關(guān)主管部門(mén)提出申請，獲得批準后方可實(shí)施采集。

4.2 保護性原則

      采集生物遺傳資源時(shí)應首先選擇非損傷性取樣，其次是非傷害性取樣，除非特殊需要不得進(jìn)行傷害性取樣。應控制采集樣品的量，盡量減少對生物體的影響和傷害。不得因為采集活動(dòng)破壞物種的種群和棲息環(huán)境。

4.3 來(lái)源披露原則

      所采集的生物遺傳資源必須披露其確切來(lái)源，包括采集的時(shí)間、地點(diǎn)、分類(lèi)地位等信息。

5 工作程序

      采集生物遺傳資源的基本程序包括：采集前的準備、實(shí)施采集、樣品的處理和貯存、記錄等。

6 采集前的準備

6.1 采集國家重點(diǎn)保護野生動(dòng)物、野生植物的遺傳資源（見(jiàn)《國家重點(diǎn)保護野生動(dòng)物名錄》和《國家重點(diǎn)保護野生植物名錄（第一批）》），應按照相關(guān)法律法規的規定，向相關(guān)主管部門(mén)提出申請，獲得批準后方可實(shí)施采集。需在自然保護區內采集遺傳資源，應向保護區管理機構提出申請，獲得批準后方可實(shí)施采集。

6.2 采集重點(diǎn)保護和瀕危生物的遺傳資源之前應充分研究其形態(tài)、生理和分布，避免因采集活動(dòng)造成不可挽回的破壞。

6.3 采集之前應制定完備的采集方案，了解野生生物的分布區域，根據當地自然情況制定采集路線(xiàn)圖，避免漫無(wú)目的的采集活動(dòng)破壞自然棲息地。

6.4 采集路線(xiàn)應采用從生物種群（居群）的分布邊緣向中心地帶推進(jìn)的方式，優(yōu)先采集種群（居群）邊緣分布的個(gè)體。如在保護區內采集，應按照實(shí)驗區、緩沖區的順序行進(jìn)。

7 采集人員

      應對采集人員進(jìn)行專(zhuān)門(mén)的培訓，使其掌握目標采集物種的分類(lèi)學(xué)、形態(tài)學(xué)知識以及生活習性、棲息環(huán)境和捕捉技巧等。

8 采集工具和材料

8.1 捕捉工具包括:捕捉網(wǎng)、自制陷阱和麻醉槍?zhuān)ㄡ槪┑?，應根據采集對象進(jìn)行選擇。

8.2 處理器材包括:剪刀（醫用或科學(xué)級的）、解剖刀、鑷子、帶帽塑料試管（或離心管）、帶帽廣口瓶、滴管、封口塑料袋、錫箔盒、乳膠手套、手搖離心機等。器材應事先洗凈并消毒，避免污染組織和傳染疾病。

8.3 記錄工具包括:記號筆、標簽紙、鉛筆等。

8.4 處理和貯存材料包括:蒸餾水、液氮、干冰、90%～100%乙醇、DNA 緩沖液、抗凝劑等。

9 采集方式和對象

9.1 基本要求

      遺傳資源采集時(shí)應首先選擇非損傷性取樣，可通過(guò)收集動(dòng)物脫落的毛發(fā)或羽毛、糞 便、食物殘渣、卵殼、蛹殼等樣品，從樣品殘留的細胞中提取遺傳資源。在無(wú)法進(jìn)行非損傷性取樣或需要較高質(zhì)量的遺傳資源時(shí)，可采用非傷害性取樣。除非特殊需要不得進(jìn)行傷害性取樣。各生物類(lèi)群的常用非傷害性取樣方式見(jiàn) 9.2-9.7。

9.2 哺乳動(dòng)物

      大型哺乳動(dòng)物可用麻醉槍擊捕捉；小型哺乳動(dòng)物如嚙齒類(lèi)等可采用捕籠活捕，然后用麻醉針麻醉。捕到哺乳動(dòng)物后，采集帶有毛囊的毛發(fā)或自頸（耳）靜脈采血。采集對象以成熟個(gè)體為主，盡量不捕獲幼體和繁殖期、哺乳期的母體。

9.3 鳥(niǎo)類(lèi)

      鳥(niǎo)類(lèi)可用網(wǎng)捕，網(wǎng)眼大小根據鳥(niǎo)類(lèi)體型變化。依據鳥(niǎo)類(lèi)習性選擇在其出沒(méi)的林緣、水域、草地等地點(diǎn)設網(wǎng)。捕到鳥(niǎo)類(lèi)后，采集羽毛或翅（腿）靜脈采血。

9.4 兩棲、爬行動(dòng)物

      兩棲、爬行動(dòng)物可采用陷阱、網(wǎng)具、套索等方法捕捉，捕獲后剪取其腳趾或尾尖。

9.5 魚(yú)類(lèi)

      魚(yú)類(lèi)采用漁網(wǎng)捕撈，網(wǎng)具選擇和網(wǎng)眼大小根據魚(yú)類(lèi)體型來(lái)定。捕獲后剝離鱗片或剪取鰭條。

9.6 無(wú)脊椎動(dòng)物

      應根據無(wú)脊椎動(dòng)物的類(lèi)群及其生活習性制定采集方法。對于飛行昆蟲(chóng)可采用網(wǎng)掃、燈誘捕捉；爬行的昆蟲(chóng)和軟體動(dòng)物等可采用陷阱捕獲；水生和底棲的軟體動(dòng)物、扁形動(dòng)物和節肢動(dòng)物等可采用抄網(wǎng)、拖網(wǎng)、采泥器等工具捕撈。獲得無(wú)脊椎動(dòng)物后，采集翅、殼、肌肉等組織。

9.7 植物和大型真菌

      植物和大型真菌的采集應參照動(dòng)物非傷害性取樣的原則，可采集新鮮的葉、芽、花、種子、子實(shí)體等組織，盡量不采集地下的根、莖。

10 采集的數量

      應盡量采集少量的樣本，一般 50 μl 血液或 200 mg 組織即可。如果研究或開(kāi)發(fā)工作需要，可適當增加采集量，但不得對生物體正常生長(cháng)、繁殖和活動(dòng)造成影響。需嚴格控制重點(diǎn)保護和瀕危物種的采集量。

11 采集樣品的處理和貯存

11.1 采集時(shí)應戴經(jīng)過(guò)消毒的乳膠手套，使用鑷子夾取樣本，樣本采集后用蒸餾水沖洗。

11.2 動(dòng)物組織放入干凈的塑料管或廣口瓶中，密封后放入液氮或干冰中貯存，也可滴入90%～100%的乙醇或DNA緩沖液將組織浸泡保存。

11.3 血液樣品中應加入抗凝劑充分混勻，然后等待其自然沉降或使用手搖離心機進(jìn)行離 心，將血細胞和血漿分離，棄去血漿，將血細胞放入液氮或干冰中貯存。

11.4 植物組織放入塑料袋中，按 1:10 的比例加入硅膠，然后擠出其中的空氣，袋口封閉后放入錫箔盒中避光保存。

采集的樣本至少要分兩份貯存，以規避風(fēng)險。樣品應在 1 周內送到實(shí)驗室進(jìn)行實(shí)驗或長(cháng)期保存。

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