HJ 505-2009 水質(zhì) 五日生化需氧量（BOD₅）的測定 稀釋與接種法

1 適用范圍

      本標準規定了測定水中五日生化需氧量(BOD₅）的稀釋與接種的方法。

      本標準適用于地表水、工業(yè)廢水和生活污水中五日生化需氧量（BOD₅）的測定。
      方法的檢出限為0.5 mg/L，方法的測定下限為2 mg/L，非稀釋法和非稀釋接種法的測定上限為 6 mg/L，稀釋與稀釋接種法的測定上限為6 000 mg/L。

2 規范性引用文件

      本標準內容引用了下列文件中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本標準。
      GB/T 6682 分析實(shí)驗室用水規格和試驗方法

      GB/T 7489 水質(zhì) 溶解氧的測定 碘量法

      GB/T 11913 水質(zhì) 溶解氧的測定 電化學(xué)探頭法

      HJ/T 91 地表水和污水監測技術(shù)規范

3 方法原理

生化需氧量是指在規定的條件下，微生物分解水中的某些可氧化的物質(zhì)，特別是分解有機物的生物化學(xué)過(guò)程消耗的溶解氧。通常情況下是指水樣充滿(mǎn)完全密閉的溶解氧瓶中，在(20±1)℃的暗處培養5d士4h或(2+5) d±4h[先在0-4℃的暗處培養2d，接著(zhù)在(20土1)℃的暗處培養5d，即培養 (2+5) d]，分別測定培養前后水樣中溶解氧的質(zhì)量濃度，由培養前后溶解氧的質(zhì)量濃度之差，計算每升樣品消耗的溶解氧量，以BOD₅形式表示。

若樣品中的有機物含量較多，BOD₅的質(zhì)量濃度大于6 mg/L，樣品需適當稀釋后測定；對不含或含微生物少的工業(yè)廢水，如酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存的廢水或經(jīng)過(guò)氯化處理等的廢水，在測定BOD₅時(shí)應進(jìn)行接種，以引進(jìn)能分解廢水中有機物的微生物。當廢水中存在難以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有機物或含有劇毒物質(zhì)時(shí)，應將馴化后的微生物引入水樣中進(jìn)行接種。

4 試劑和材料

      本標準所用試劑除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國家標準的分析純化學(xué)試劑。

4.1 水：實(shí)驗用水為符合GB/T 6682規定的3級蒸餾水，且水中銅離子的質(zhì)量濃度不大于0.01 mg/L, 不含有氯或氯胺等物質(zhì)。

4.2 接種液：可購買(mǎi)接種微生物用的接種物質(zhì)，接種液的配制和使用按說(shuō)明書(shū)的要求操作。也可按以下方法獲得接種液。

4.2.1 未受工業(yè)廢水污染的生活污水：化學(xué)需氧量不大于300mg/L，總有機碳不大于100 mg/L。
4.2.2 含有城鎮污水的河水或湖水。

4.2.3 污水處理廠(chǎng)的出水。

4.2.4 分析含有難降解物質(zhì)的工業(yè)廢水時(shí)，在其排污口下游適當處取水樣作為廢水的馴化接種液。也可取中和或經(jīng)適當稀釋后的廢水進(jìn)行連續曝氣，每天加入少量該種廢水，同時(shí)加入少量生活污水，使適應該種廢水的微生物大量繁殖。當水中出現大量的絮狀物時(shí)，表明微生物己繁殖，可用作接種液。一般馴化過(guò)程需3-8d。

4.3 鹽溶液

4.3.1 磷酸鹽緩沖溶液：將8.5g磷酸二氫鉀（kH₂PO₄)、 21.8g磷酸氫二鉀（K₂HPO₄)、 33.4g七水合磷酸氫二鈉（Na₂HPO₄?7H₂O）和1.7 g氯化銨(NH₄Cl)溶于水中，稀釋至1 000 ml，此溶液在0~4℃可穩定保存6個(gè)月。此溶液的pH值為7.2。

4.3.2 硫酸鎂溶液，ρ(MgSO₄)= 11.0g/L：將22.5 g七水合硫酸鎂（MgSO₄?7H₂O）溶于水中，稀釋至1 000 ml，此溶液在0~4℃可穩定保存6個(gè)月，若發(fā)現任何沉淀或微生物生長(cháng)應棄去。

4.3.3 氯化鈣溶液，ρ(CaCl₂)=27.6 g/L：將27.6g無(wú)水氯化鈣（CaCl₂)溶于水中，稀釋至1000 ml, 此溶液在0~4℃可穩定保存6個(gè)月，若發(fā)現任何沉淀或微生物生長(cháng)應棄去。

4.3.4 氯化鐵溶液，ρ (FeCl₃）=0.15 g/L：將0.25 g六水合氯化鐵（FeCI₃?6H₂O）溶于水中，稀釋至 1 000 ml，此溶液在0~4℃可穩定保存6個(gè)月，若發(fā)現任何沉淀或微生物生長(cháng)應棄去。

4.4 稀釋水：在5-20L的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水溫在(20±1)℃，用曝氣裝置(5.9)至少曝氣1h，使稀釋水中的溶解氧達到8mg/L以上。使用前每升水中加入上述四種鹽溶液(4.3)各 1.0 ml,混勻，20℃保存。在曝氣的過(guò)程中防止污染，特別是防止帶入有機物、金屬、氧化物或還原物。

稀釋水中氧的質(zhì)量濃度不能過(guò)飽和，使用前需開(kāi)口放置1h，且應在24 h內使用。剩余的稀釋水應棄去。

4.5 接種稀釋水：根據接種液的來(lái)源不同，每升稀釋水(4.4）中加入適量接種液(4.2)：城市生活污水和污水處理廠(chǎng)出水加1~10 ml，河水或湖水加10~100 ml，將接種稀釋水存放在（20±1)℃的環(huán)境中，當天配制當天使用。接種的稀釋水pH值為7.2, BOD₅應小于1.5 mg/L。

4.6 鹽酸溶液，c(HCl)=0.5 mol/L：將40 mL濃鹽酸（HCI)溶于水中，稀釋至1 000ml。4.7氫氧化鈉溶液，C(NaOH)=0.5 mol/L：將20 g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至1 000ml。

4.8 亞硫酸鈉溶液，c(Na₂SO₃)=0.25 mol/L：將1.575 g亞硫酸鈉（Na₂SO₃）溶于水中，稀釋至1 000 ml。此溶液不穩定，需現用現配。

4.9 葡萄糖-谷氨酸標準溶液：將葡萄糖（C₆H₁₂O₆，優(yōu)級純）和谷氨酸（HOOC-CH₂-CH₂-CHNH₂-COOH,優(yōu)級純）在130℃干燥lh，各稱(chēng)取150mg溶于水中，在1 000 ml容量瓶中稀釋至標線(xiàn)。此溶液的BOD₅ 為（210±20) mg/L，現用現配。該溶液也可少量冷凍保存，融化后立刻使用。

4.10 丙烯基硫脈硝化抑制劑，ρ(C₄H₈N₂S)=1.0 g/L：溶解0.20 g丙烯基硫脈(C₄H₈N₂S)于200 ml水中混合，4℃保存，此溶液可穩定保存14d。

4.11 乙酸溶液，1+1。

4.12 碘化鉀溶液，ρ (Kl)=100g/L：將10g碘化鉀（KI）溶于水中，稀釋至100ml。
4.13 淀粉溶液，ρ =5g/L：將0.50g淀粉溶于水中，稀釋至100ml。

5 儀器和設備
      本標準除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國家A級標準的玻璃量器。本標準使用的玻璃儀器須清潔、 無(wú)毒性和可生化降解的物質(zhì)。

5.1 濾膜：孔徑為1.6μm。

5.2 溶解氧瓶：帶水封裝置，容積250~300 ml。

5.3 稀釋容器：1000~2000 ml的量筒或容量瓶。

5.4 虹吸管：供分取水樣或添加稀釋水。