GB/T 24800.4-2009 化妝品中氯噻酮和吩噻嗪的測定 高效液相色譜法

5 試驗步驟

5.1 提取

稱(chēng)取化妝品試樣0.5g（精確到0.001g),置于10mL具塞離心管中，加人丙酮(3.1)6 mL，充分混勻，在超聲波清洗器中超聲提取10min，以15000r/min離心10min，將上清液轉移至25 mL具塞管中，下層沉淀用丙酮(3. 1)重復提取兩次，每次2 mL，合并上清液，用30 mmol/L磷酸二氫鈉溶液（3. 8) 定容至25 mL,混勻。取約5mL上述溶液于離心管中，以15 000 r/min離心15min，上清液過(guò)0. 45μm 有機濾膜后，待用。

5.2 測定

5.2.1 色譜條件

5.2.1.1 色譜柱：C₁₈：柱：250 mm×4. 6 mm（內徑），顆粒直徑5μm，或相當者。

5.2.1.2 流動(dòng)相：A:30 mmol/L磷酸二氫鈉溶液（3.8),B甲醇（3. 4)，梯度洗脫條件見(jiàn)表1。

表1方法的梯度洗脫條件

5.2.1.3 流速：1.0 mL/min,

5.2.1.4 檢測波長(cháng)：230 nm,

5.2.1.5 色譜柱溫:30℃。

5.2.1.6 進(jìn)樣量:20μL。

5.2.2 標準工作曲線(xiàn)繪制
      取濃度為0.2 mg/L,0.5mg/L,2mg/L,5mg/L,20mg/L的標準工作溶液（3.11)，按色譜條件 (5.2.1)行測定，以色譜峰的峰面積為縱坐標，對應的溶液濃度為橫坐標作圖，繪制標準工作曲線(xiàn)。

標準物質(zhì)色譜圖參見(jiàn)附錄A的圖A.1,

5.3 試樣測定

試樣溶液（5. 1)注人液相色譜儀，按色譜條件（5. 2. 1)進(jìn)行測定，記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積，由色譜峰的峰面積可從標準曲線(xiàn)上求出相應的色譜峰濃度。樣品溶液中的氯噻酮和吩噻嗪的響應值均應在標準工作曲線(xiàn)濃度范圍之內，氯噻酮和吩噻嗪含量高的試樣可取適量試樣溶液用流動(dòng)相稀釋后進(jìn)行測定。必要時(shí)，陽(yáng)性樣品需用其他方法進(jìn)行確認試驗。

5.4 空白試驗

      除不稱(chēng)取試樣外，均按上述操作步驟進(jìn)行。

6 結果計算

      結果按式（1）計算（計算結果應扣除空白值）:

      X_i-樣品中氯噻酮和吩噻嗪的質(zhì)量濃度，單位為毫克每千克（mg/kg);

      C_i-標準曲線(xiàn)計算所得氯噻酮和吩噻嗪的濃度，單位為毫克每升（mg/L);

      C₀-標準曲線(xiàn)計算所得空白樣品中氯噻酮和吩噻嗪的濃度，單位為毫克每升（mg/L);

      V_i-樣品稀釋后的總體積，單位為毫升（mL);

      m-樣品質(zhì)量，單位為克（g）。

更多標準內容點(diǎn)擊以下鏈接獲取標準全文：

下載地址：《GB/T 24800.4-2009 化妝品中氯噻酮和吩噻嗪的測定 高效液相色譜法》