GB/T 24800.5-2009 化妝品中呋喃妥因和呋喃唑酮的測定 高效液相色譜法

5 測定步驟

5.1 樣品處理

稱(chēng)取化妝品試樣0. 5 g（精確到0.001g)，置于25 mL具塞比色管中，加入15 mL提取劑（3. 6)，充分混勻，在超聲波清洗器中超聲提取20 min，然后用去離子水定容至25 mL,混勻。取約10 mL上述溶液于離心管中，以5000 r/min高速離心20 min，取上清液，經(jīng)0.45 μm有機過(guò)濾膜(3.11)過(guò)濾，濾液供液相色譜測定用。

5.2 測定

5.2.1 色譜條件

5.2.1.1 色譜柱：ODS C₁₈柱：250mm×4.6mm,粒徑5μm，或相當者。

5.2.1.2 流動(dòng)相：乙腈加0.4％乙酸水溶液（30+70,v/v)。

5.2.1.3 流速：1.0mL/min。

5.2.1.4 檢測波長(cháng)：365nm。

5.2.1.5 柱溫：25℃。

5.2.1.6 進(jìn)樣量：10μL。

5.2.2 標準工作曲線(xiàn)繪制

分別移取10μL濃度為0.2μg/mL,0.5μg/mL,1.0μg/mL,5.0μg/mL,10 μg/mL,20μg/mL的標準工作溶液(3.10)，按色譜條件（5. 2. 1)進(jìn)行測定，以色譜峰的峰面積為縱坐標，對應的溶液濃度為橫坐標作圖，繪制標準工作曲線(xiàn)。

標準物質(zhì)色譜圖參見(jiàn)附錄八的圖A.1,

5.2.3 試樣測定

用微量注射器準確吸取10μL處理后的樣品溶液（5. 1)注入液相色譜儀，按色譜條件（5. 2. 1)進(jìn)行測定，記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積，由色譜峰的峰面積可從標準曲線(xiàn)上求出相應的色譜峰濃度。樣品溶液中的呋喃妥因和呋喃唑酮的響應值均應在儀器測定的線(xiàn)性范圍之內。呋喃妥因和呋喃唑酮含量高的試樣可取適量試樣溶液用流動(dòng)相稀釋后進(jìn)行測定。

5.2.4 定性確認

液相色譜儀對樣品進(jìn)行定性測定，進(jìn)行樣品測定時(shí)，如果檢出呋喃妥因和呋喃唑酮的色譜峰的保留時(shí)間與標準品相一致，并且在扣除背景后的樣品色譜圖中，該物質(zhì)的紫外吸收圖譜與標準品的紫外吸收圖譜相一致，則可初步確認樣品中存在呋喃妥因和呋喃唑酮。必要時(shí)，陽(yáng)性樣品需用其他方法進(jìn)行確認試驗。

5.3 平行試驗

      按以上步驟，對同一試樣進(jìn)行平行試驗測定。

5.4 空白試驗

      除不稱(chēng)取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。

6 結果計算

      結果按式（1)計算（計算結果應扣除空白值）:

      式中：

      X_i一樣品中呋喃妥因或呋喃唑酮的質(zhì)量濃度，單位為毫克每千克（mg/kg);

      C_i一標準曲線(xiàn)查得呋喃妥因或呋喃唑酮的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL)

      V_i一樣品稀釋后的總體積，單位為毫升（mL);

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